近来连续做了两批CIA模型,看园子里有人询问这方面的问题,有些经验分享给大家
1、动物选择,我用的是灰色的DBA/1J小鼠,北京就有出售的,月龄是6-8周,体重大多在18克左右,动物来了第二天我就开始第一次免疫了
2、胶原和佐剂 我用的都是博雷德代理的Chondrex公司的,我的第一批佐剂是自己配制的,第二批是买Chondrex公司的,但第二批造出的模型相对比较稳定,评分等和文献上的也比较一致。
3、胶原佐剂的乳化,这是造模比较关键的一步,我一般就是照着说明书做的,等体积混合,乳化一定在4°冰上进行,否则胶原容易变性。乳化完全的标准是滴在水上乳滴不扩散。
4、注射,一般选择尾根靠下1-2厘米处,皮下注射,100ul
5、发病天数,第21天做再次免疫,之后4-5天就陆续有发病的小鼠,到初次免疫38天左右到达高峰,一般到45天就可以达到100%
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